外泌体分离鉴定一站式服务 量身打造高性价比的实验方案
外泌体简介:
外泌体(Exosome)是细胞分泌的一种直径在30-150nm,密度为1.12-1.19g/mL的具有磷脂双分子层的膜泡结构,其内包含蛋白质、miRNA、mRNA、lncRNA、DNA片段、细胞因子和脂类等多种物质,承载了丰富的生物信息。研究发现几乎所有类型的细胞都可以分泌外泌体,广泛存在于包括组织液、血液、唾液、尿液、脑脊液和母乳中。
近年来,外泌体在胞间物质交流和信号传递方面的显著作用越来越受到重视,成为了新的研究热点。外泌体作为细胞间通讯方式之一,在生长发育、感染、肿瘤发生与转移等多种生理病理过程中扮演着重要角色,既可作为疾病诊断和预后的循环生物标志物;同时,外泌体的载体性质还可应用于靶向药物和基因治疗的生物学材料,具有极大的研究价值和开发潜力。
分离纯化:
外泌体研究的第一步需要有效地提取及分离各种体液样本中的exosome。目前常见的外泌体分离纯化方法有以下几种:
方法 | 基本原理 | 纯度 | 优势 | 缺陷 |
超高速离心 | 沉降系数 | + | 产率高 | 纯度不足 影响活性 |
密度梯度离心) | 沉降系数 | +++ | 纯度高 | 繁琐、耗时; 产量低 |
层阻法 | 颗粒大小 / 表面亲和吸附 | ++ | 操作简便; 不影响活性 | 成本高; 洗脱体积大 |
沉淀法 | 亲脂聚合 | ++ | 操作简便; 产率高 | 纯度不足 |
离子吸附 | 电荷吸附 | ++ | 操作简便; 产率高 | 纯度不足 吸附倾向性 |
免疫/亲和蛋白磁珠法 | 抗体吸附 | ++ | 不影响活性; | 成本高; 吸附倾向性 |
● 透射电镜进行形态学观察。电镜下外泌体的典型结构为茶托型或一侧凹陷的半球形。
● 纳米粒径分析。纳米颗粒跟踪分析(Nanoparticle Tracking Analysis, NTA)技术允许实时地对悬浮液中50 nm - 1000 nm直径范围内特定的外泌体和微囊泡进行逐个的直接成像和观察,同时测算和统计样品中粒子的直径分布和浓度。NTA可提供高分辨率的粒度分布图表和浓度信息,并且可与荧光标记联合使用,选择性地确定和分析复杂样品中特定类型的颗粒。
● 外泌体常见蛋白最好的网赌软件。提供专门用于最好的网赌软件外泌体常见蛋白marker 的Western Blot如:CD63,CD9,HSP70,TSG01,Flotillin等。
服务说明:
3大服务特点:
● 根据样本条件 贴心优化
● 电镜、NTA、WB三位一体
● Real-timePCR、Digital PCR、二代测序 量身打造
探索:
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● 外泌体RNA二代测序建库
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